原子力顯微鏡制樣是確保獲得準(zhǔn)確、可靠觀測(cè)結(jié)果的重要步驟。以下是一些常用的AFM原子力顯微鏡制樣方法及其要點(diǎn):
一、基本原則
樣品固定:樣品需要平整且牢固地固定在基底上,以防止在掃描過(guò)程中移動(dòng)或脫落。
樣品清潔:確保樣品表面干凈,無(wú)污染物,以免影響探針和成像結(jié)果。
二、具體制樣方法
1. 硬材料和塊體樣品
機(jī)械剝離法:
適用于硬材料,如使用針尖或刀片對(duì)樣品進(jìn)行劃割或剝離,以獲得所需的表面形貌。
優(yōu)點(diǎn):操作簡(jiǎn)單、成本低廉,可在常溫下進(jìn)行。
注意:需控制力量,避免引入人為誤差導(dǎo)致樣品損傷。
清潔與固定:
清潔樣品表面,可使用氮?dú)獯祾?、酒精或丙酮等試劑清洗?/span>
直徑大于10mm的塊體樣品可直接放置在樣品臺(tái)上,通過(guò)真空吸附固定;小于10mm的樣品則需粘貼到鐵片等基底上進(jìn)行測(cè)試。
2. 薄膜樣品
清潔與粘貼:
清潔薄膜表面,確保其無(wú)雜質(zhì)。
使用專用雙面膠帶將薄膜粘貼到基底上,確保粘貼牢固且薄膜平整無(wú)氣泡。
3. 生物樣品
蛋白質(zhì)、DNA等:
調(diào)節(jié)溶液pH值或加入正離子等方法,利用靜電相互作用將樣品吸附在云母等基底上。
對(duì)于DNA,可先用硅烷化試劑修飾基底表面,使其帶正電,再吸附DNA分子。
細(xì)胞樣品:
溶液分散法:將細(xì)胞溶液滴加到硅片或云母上,靜置后吹干。
固定方法:可采用自然干燥法、戊二醛固定法或瓊脂糖凝膠固定法。瓊脂糖凝膠固定法對(duì)細(xì)胞損傷小,能更好地維持細(xì)胞原始狀態(tài)。
注意事項(xiàng):為防止培養(yǎng)液中的鹽等成分干擾,需對(duì)樣品進(jìn)行清洗。
4. 粉末樣品
超聲分散法:
將粉末放入酒精或丙酮等溶劑中超聲分散,使其均勻。
將分散液滴加到云母、硅片或玻璃片上,加熱烘干后測(cè)試。
5. 導(dǎo)電樣品
導(dǎo)電襯底準(zhǔn)備:
襯底表面需鍍金、鉑等導(dǎo)電薄膜。
使用導(dǎo)電銀漿等將樣品固定在導(dǎo)電襯底上,并確保樣品與襯底導(dǎo)通。
三、注意事項(xiàng)
樣品尺寸與形狀:確保樣品尺寸適合原子力顯微鏡的觀測(cè)范圍,且形狀平整,無(wú)明顯起伏。
樣品測(cè)試面:測(cè)試面需平整,無(wú)明顯缺陷或污染物。
樣品固定:固定方法需牢固可靠,避免在掃描過(guò)程中樣品移動(dòng)或脫落。
清洗與干燥:根據(jù)樣品類型選擇合適的清洗和干燥方法,確保樣品表面干凈且無(wú)殘留溶劑。
綜上所述,AFM原子力顯微鏡制樣方法需根據(jù)樣品類型、形狀和尺寸等因素綜合考慮,以確保獲得高質(zhì)量的觀測(cè)結(jié)果。